【色譜問答】離子色譜柱能用純水沖洗嗎?
更新時間:2021-10-11 瀏覽次數(shù):1815
用純水短時間內(nèi)沖洗色譜柱,通常不會對色譜柱造成較大的損傷,但如果長時間用水沖洗色譜柱則可能引起固定相流失和相塌陷現(xiàn)象,
所以若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱。
建議在水中加入一定量的甲醇或乙腈進(jìn)行沖洗,通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
原因分析:
首先,由于目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質(zhì),硅膠的溶解特點(diǎn)是在純水中的溶解度比在含有一定濃度有機(jī)溶劑的流動相中要大得多,
所以長時間的用純水沖洗會導(dǎo)致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,對于常規(guī)的C18柱而言,由于C18長鏈與水是不互溶的,C18長鏈之間的相互作用力大于C18與水分子的作用力,長時間的用水沖洗,
使得C18長鏈之間相互靠近,水流的沖刷,導(dǎo)致相互聯(lián)結(jié)的C18長鏈倒伏在硅膠基質(zhì)的表面,對疏水性物質(zhì)的保留能力下降,即相塌陷。
有些廠家推出了適于做離子色譜柱沖洗的純水柱,這種純水柱可以用純水作流動相而不會產(chǎn)生相塌陷,這對只溶于純水的樣品的分析提供了一個
很好的選擇。
第三,如使用過含緩沖鹽的流動相的色譜柱,用純水沖洗,并一定能將緩沖鹽*洗去。
因?yàn)?,由于緩沖鹽難溶于有機(jī)溶劑,C18反相柱中用的填料是在硅膠表面上接上許許多多的C18長鏈,相當(dāng)于一個疏水的有機(jī)相,而硅膠基體
被有機(jī)物質(zhì)包裹著,所以用純緩沖鹽水溶液做流動相時也許緩沖鹽不容易到達(dá)硅膠基質(zhì),不至損害基體。但所用的流動相通常會含一部分有機(jī)
溶劑,而且這些有機(jī)溶劑與C18長鏈?zhǔn)腔ト艿?,因此有機(jī)溶劑的加入增強(qiáng)了流動相滲入硅膠基質(zhì)的能力,能使部分緩沖鹽達(dá)到硅膠基質(zhì)。
同樣的道理,用純水沖洗只能洗掉表面的緩沖鹽,而滲入深處的緩沖鹽則仍然殘留在那里。所以在水中加入部分有機(jī)溶劑進(jìn)行沖洗,一般的C18
柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要視分析時使用的流動相來定,原則上,用于沖洗的流動相中水的比例應(yīng)該等于或高于(緩沖鹽用后清
洗的情況,推薦使用“等于")分析時所用流動相中水的比例。
和泰Thelab實(shí)驗(yàn)室超純水系統(tǒng)的全系列低有機(jī)物型超純水機(jī),采用雙波長(185nm&254nm)UV紫外燈組件(進(jìn)口燈管),可以有效殺菌,降低系統(tǒng)TOC
水平至1-3ppb,*離子色譜等分析儀器對超純水TOC的要求。